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產(chǎn)品中心

康為世紀 酵母質(zhì)粒小提試劑盒

  • 型   號:CW0509S
  • 價   格:

產(chǎn)品名稱:康為世紀 酵母質(zhì)粒小提試劑盒
產(chǎn)品貨號:CW0509S
英文名稱:Yeast Plasmid Mini Kit
產(chǎn)品規(guī)格:50 preps

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產(chǎn)品簡介:

 本試劑盒在普通堿裂解法的基礎上進行了改進,玻璃珠可以有效的破除酵母細胞壁,新型硅基質(zhì)膜和緩沖液系統(tǒng)能高效專一的結(jié)合質(zhì)粒DNA,同時可以最大限度去除蛋白及其他雜質(zhì),整個過程方便快捷,不需使用有毒有害試劑,可以同時處理多個樣品。除適用于酵母細胞外,也可用于大腸桿菌。使用本試劑盒提取的質(zhì)粒DNA可用于各種分子生物學實驗,如連接、轉(zhuǎn)化、測序和文庫篩選等。


產(chǎn)品名稱:康為世紀 酵母質(zhì)粒小提試劑盒

產(chǎn)品貨號:CW0509S


產(chǎn)品組分:

組分10.png


額外試劑需求:β-巰基乙醇、無水乙醇。


使用注意:

1.所有組分可在干燥、室溫(15-30℃)環(huán)境穩(wěn)定保存1年,將吸附柱置于2-8℃可保存更長時間,加入RNase A的Buffer P1 置于2-8℃可穩(wěn)定保存6個月。

2.第一次使用前,將RNase A溶液全部加入到Buffer P1中,混勻,置于2–8℃保存。

3.第一次使用前應按照試劑瓶標簽的說明先在Buffer PW中加入無水乙醇。

4.使用前請檢查Buffer P2、Buffer N3是否出現(xiàn)結(jié)晶或者沉淀,如有結(jié)晶或者沉淀現(xiàn)象,可在37℃水浴幾分鐘,即可恢復澄清。

5.注意不要直接接觸Buffer P2和Buffer N3,使用后應立即蓋緊蓋子。

6.提取的質(zhì)粒量與酵母菌株、質(zhì)??截悢?shù)、培養(yǎng)條件等因素有關,通常酵母質(zhì)??截悢?shù)都很低,通過電泳或分光光度計法都很難檢測到。



相關知識:

細菌的收獲可通過離心來進行, 而細菌的裂解則可以采用多種方法中的任意一種, 這些方法包括用非離子型或離子型去污劑、 有機溶劑或堿進行處理及用加熱處理等。 選擇哪一種方法取決于3個因素:質(zhì)粒的大小、小腸桿菌菌株及裂解后用于純化質(zhì)粒 DNA 的技術。

1)大質(zhì)粒 (大于 15kb) 容易受損, 故應采用漫和裂解法從細胞中釋放出來。 將細菌懸于蔗糖等滲溶液中,然后用溶菌酶和 EDTA 進生處理,破壞細胞壁和細胞外膜,再加入 SDS 一類去污劑溶解球形體。 這種方法最大限度地減小了從具有正壓的細菌部把質(zhì)粒釋放出來所需要的作用力。

2)可用更劇烈的方法來分離小質(zhì)粒。在加入 EDTA 后,有時還在加入溶菌酶后讓細菌

暴露于去污劑, 通過煮沸或堿處理使之裂解。 這些處理可破壞堿基配對, 故可使宿主的線狀染色體 DNA 變性,但閉環(huán)質(zhì)粒 DNA 鏈由于處于拓撲纏繞狀態(tài)而不能彼此分開。當條件恢復正常時,質(zhì)粒 DNA 鏈迅速得到準確配置,重新形成*天然的超螺旋分子。

3)一些大腸桿菌菌株 (如 HB101 的一些變種衍生株 ) 用去污劑或加熱裂解時可釋放相對大量的糖類, 當隨后用氯化銫-溴化乙錠梯度平衡離心進行質(zhì)粒純化時它們會惹出麻煩。 糖類會在梯度中緊靠超螺旋質(zhì)粒 DNA 所占位置形成一致密的、模糊的區(qū)帶。因此很難避免質(zhì)粒 DNA 內(nèi)污染有糖類,而糖類可抑制多種限制酶的活性。 故從諸 如 HB101 和 TG1 等大腸桿菌蓖株中大量制備質(zhì)粒時,不宜使用煮沸法。

4)當從表達內(nèi)切核酸酶 A 的大腸桿菌菌株 (endA+ 株,如 HB101) 中小量制備質(zhì)粒時,建議不使用煮沸法。 因為煮沸不能*滅活內(nèi)切核酸酶 A,以后在溫育 (如用限制酶消化 )時,質(zhì)粒 DNA 會被降解。但如果通過一個附加步驟 (用酚:氯仿進行抽提 )可以避免此問題。


儲存與運輸

室溫 (15-30℃)


產(chǎn)品訂購信息  

品牌               貨號                名稱                     規(guī)格

康為世紀     CW0509S     酵母質(zhì)粒小提試劑盒     50preps


產(chǎn)品名稱:康為世紀 酵母質(zhì)粒小提試劑盒

產(chǎn)品貨號:CW0509S


關于公司:

康為世紀生物科技股份有限公司是一家立足于生命科學領域,有自主知識產(chǎn)權的國家優(yōu)良企業(yè),主要從事高附加值、高技術含量的生物試劑的研發(fā)與生產(chǎn),為生命科學研究、基因檢測和體外診斷用戶提供創(chuàng)新型生物產(chǎn)品和服務。產(chǎn)品線主要包括分子診斷原料酶、核酸采集與保護劑、核酸提取、分子診斷檢測試劑等,打破了中國生物研究與產(chǎn)業(yè)對進口試劑的依賴。


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