康為世紀 Bacteria Genomic DNA提取試劑
產品名稱:康為世紀 Bacteria Genomic DNA提取試劑產品貨號:CW0552S英文名稱:Bacteria Genomic DNA Kit產品規(guī)格:50 preps
產品介紹:
本試劑盒適用于從革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽性菌中提取高純度總DNA,每次可處理106-108個細胞,獲得多至20 μg的總DNA。純化過程中不需苯酚或氯仿等有毒溶劑,無需乙醇沉淀,一小時內即可獲得高純度DNA。本試劑盒采用優(yōu)化的緩沖體系使裂解液中的DNA高效特異的結合到硅基質離心吸附柱上,而其他污染物可流過膜,PCR和其他酶促反應的抑制劑可通過兩步洗滌步驟被有效去除,最后使用低鹽緩沖液或水洗脫,即可獲得高純度DNA。純化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-TimePCR、文庫構建、Southern Blot、分子標記等下游實驗。
產品名稱:康為世紀 Bacteria Genomic DNA提取試劑
產品貨號:CW0552S
產品組份:
產品使用說明:
實驗步驟:
以革蘭氏陰性菌基因組DNA的提取為例
1.取細菌培養(yǎng)物1-5 ml(106-108個細胞,最多不超過2×109個細胞)置于離心管(自備)中,12,000 rpm(~13,400×g)離心1分鐘,盡量吸凈上清。
2.向沉淀中加入180 μl Buffer GTL,振蕩使菌體重懸。
3.加入20 μl Proteinase K,渦旋混勻,56℃孵育,直至溶液變清亮,孵育過程中每隔一段時間顛倒或震蕩離心管使樣本分散。
4.加入200 μl Buffer GL,渦旋震蕩充分混勻。加200 μl無水乙醇,渦旋震蕩充分混勻。短暫離心,使管壁上的溶液收集到管底。
5.將步驟4所得溶液(包括形成的沉淀)全部加入到已裝入收集管的吸附柱(Spin
Columns DM)中,若一次不能加完溶液,可分多次轉入。12,000 rpm離心1分鐘,棄廢液,將吸附柱放回收集管中。
6.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW1(使用前檢查是否已加入無水乙醇),12,000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱放回收集管中。
7.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW2(使用前檢查是否已加入無水乙醇),12,000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱放回收集管中。
8.12,000 rpm離心2分鐘,倒掉收集管中的廢液。將吸附柱置于室溫數分鐘,以*晾干。
9.將吸附柱置于一個新的離心管中,向吸附柱的中間部位懸空加入50-200 μl Buffer
GE,室溫放置2-5分鐘,12,000 rpm離心1分鐘,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
以革蘭氏陽性菌基因組DNA的提取為例
1.取細菌培養(yǎng)物1-5 ml(106-108個細胞,最多不超過2×109
個細胞)置于離心管(自備)中,12,000 rpm(~13,400×g)離心1分鐘,盡量吸凈上清。
2.加入180 μl Enzymatic Lysis Buffer(自備)使菌體重懸。
3.37℃孵育30分鐘。
4.加入20 μl Proteinase K渦旋震蕩,充分混勻。加入200 μl Buffer GL,渦旋震蕩混勻。
5.56℃孵育30分鐘。
2)如需去除RNA,可在上述步驟完成后,加入4 μl濃度為100 mg/ml的RNase A溶液(貨號:CW0601S),震蕩混勻,室溫放置5-10分鐘。
6.加入200 μl無水乙醇,渦旋震蕩充分混勻。
7.將步驟6所得溶液(包括形成的沉淀)全部加入到已裝入收集管的吸附柱(Spin
Columns DM),若一次不能加完溶液,可分多次轉入。12,000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
8.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW1(使用前檢查是否已加入無水乙醇),12,000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
9.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW2(使用前檢查是否已加入無水乙醇),12,000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
10.12,000 rpm離心2分鐘,倒掉收集管中的廢液。將吸附柱置于室溫數分鐘*晾干。
11.將吸附柱置于一個新離心管(自備)中,向吸附柱中間部位懸空加入50-200 μl Buffer GE,室溫放置2-5分鐘,12,000 rpm離心1分鐘,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
儲存與運輸:
室溫(15-30℃)
產品訂購信息:
品牌 貨號 名稱 規(guī)格
康為世紀 CW0552M Bacteria Genomic DNA Kit 200 preps
產品名稱:康為世紀 Bacteria Genomic DNA提取試劑
產品貨號:CW0552S
關于公司:
康為世紀生物科技股份有限公司是一家立足于生命科學領域,有自主知識產權的國家優(yōu)良企業(yè),主要從事高附加值、高技術含量的生物試劑的研發(fā)與生產,為生命科學研究、基因檢測和體外診斷用戶提供創(chuàng)新型生物產品和服務。公司曾先后被評為國家優(yōu)良企業(yè)、江蘇省科技型中小企業(yè)、江蘇省瞪羚企業(yè)、江蘇省民營科技企業(yè)。公司建立了專業(yè)化、集約化、能夠形成自主知識產權的技術創(chuàng)新體系和開放式的合作創(chuàng)新平臺,構建成了公司完整的研發(fā)創(chuàng)新體系。
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