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一起來了解一下免疫細(xì)胞無血清培養(yǎng)基的使用方法吧
更新時間：2020-04-15 點(diǎn)擊次數(shù)：1489次
免疫細(xì)胞無血清培養(yǎng)基可用于臍帶血或外周血中分離到的單核細(xì)胞向CIK細(xì)胞(細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞)的體外誘導(dǎo)及體外大規(guī)模擴(kuò)增培養(yǎng)。
免疫細(xì)胞無血清培養(yǎng)基使用方法
1、采集與分離外周血采集外周血，F(xiàn)icoll密度梯度離心分離收集單個核細(xì)胞。
2、單個核細(xì)胞的接種與誘導(dǎo)活化
1) 0d時，繃胞計(jì)數(shù)。按細(xì)胞密度2x106cell/mL接種至對應(yīng)體積的培養(yǎng)液中。添加誘導(dǎo)因子YC001一支。添加10%比例的自體血漿。
2) 1d時(24小時)，添加誘導(dǎo)因子YC002、YC003、YC004至已經(jīng)接種細(xì)胞的培養(yǎng)液中。將YC005添加至未經(jīng)使用的培養(yǎng)基中，待用。
3、細(xì)胞的連續(xù)培養(yǎng)與擴(kuò)增
1) 3d時，補(bǔ)入新鮮培養(yǎng)液，調(diào)整細(xì)胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。同時添加新加入培養(yǎng)液體積l10%比例的自體血漿。補(bǔ)液比例大致在1：2左右(原有培養(yǎng)液體積：新加培養(yǎng)液體積)
2) 5d時，補(bǔ)入新鮮培養(yǎng)液，調(diào)整細(xì)胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。補(bǔ)液比例大致在1：3左右。
3) 7d時，補(bǔ)入新鮮培養(yǎng)液，調(diào)整細(xì)胞密度至(06-08)x106cell/mL。補(bǔ)液比例大致在1：2左右。
4) 9d時，將剩余培養(yǎng)液全部加入。
主要特點(diǎn)
1、無血清、不含異源動物成分;所有成分都是明確的，且同種來源(人)，包括蛋白質(zhì);不含抗生素;
2、能夠培養(yǎng)人淋巴細(xì)胞、CIK、DC、NK等各類免疫細(xì)胞;
3、具有很高的成活率和擴(kuò)增倍數(shù);
4、能夠維持高密度培養(yǎng);
5、具有很高的殺傷活性。
注意事項(xiàng)
1、如果觀察培養(yǎng)基種有可見的沉淀物，不能再使用;
2、超過標(biāo)簽上的截止使用日期，不得再使用;
3、所有組分均應(yīng)避光保存;
5、本產(chǎn)品請于陰涼干燥處避光保存，保存條件:2-8℃，避免反復(fù)凍融。拆封后請于2周內(nèi)用完。
