有冷凍就有解凍,了解一下凍存管的解凍步驟吧
更新時間:2022-09-22 點擊次數(shù):1931次
凍存管有IATA航空運輸協(xié)會標準測試證書,常規(guī)儲存細胞培養(yǎng)物,組織樣品,微生物樣品(如病毒,細菌,酵母,真菌,孢子等),人源或動物源其它生物樣品(如血液,血清,精液,抗體,RNA,DNA和蛋白樣本),不適合存儲再生醫(yī)學樣本。
解凍步驟
1、從液氮罐取出凍存的細胞后立即置于37℃水浴搖晃凍存管1-2分鐘。解凍過程需要越快越好。
2、轉移解凍的細胞于15mL離心管,立即用大量的含有血清的細胞培養(yǎng)基混勻。
3、500xg離心細胞5分鐘,去除上清液,用適量的含有血清的細胞培養(yǎng)基重新懸浮細胞,然后轉移到細胞培養(yǎng)瓶。
4、按照建議的細胞濃度接種。
5、接下來的12小時細胞進入靜默期。
6、間隔24小時和48小時更換培養(yǎng)基
下面讓我們來了解一下凍存管在使用時有哪些注意事項吧
凍存管用來存儲樣品,只能置于液氮氣相或冰箱。禁止凍存管浸沒于液氮液相,否則液氮可能滲入凍存管。因此,解凍時,蒸發(fā)的液氮產(chǎn)生高壓力,最終導致凍存管炸裂,并且還將導致感染物質釋放。
因此,操作凍存管時需要佩戴合適的個人安全防護措施,如穿戴安全防護服、佩戴護目鏡、在安全櫥操作。
進行冷凍保存時,凍存管需要緩慢地降溫至冷凍溫度。如果不是緩慢地降溫到冷凍溫度,將導致冰塞形成(如在凍存管頂部),冰塞將阻礙液體形成凝固,將導致高壓力危險和后續(xù)的爆管風險。
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