在使用人外周血淋巴細(xì)胞分離液時(shí)有哪些注意事項(xiàng)呢
更新時(shí)間：2022-01-20 點(diǎn)擊次數(shù)：1278次
人外周血淋巴細(xì)胞分離液嚴(yán)格無(wú)菌、無(wú)毒、極低內(nèi)毒素、不影響細(xì)胞生物學(xué)功能，人外周血淋巴細(xì)胞分離液主要用于分離人外周血淋巴細(xì)胞的分離，也適用于大多數(shù)哺乳動(dòng)物單個(gè)核細(xì)胞的分離。
下面讓我們一起來(lái)了解一下人外周血淋巴細(xì)胞分離液操作技術(shù)相關(guān)的注意事項(xiàng)：
⑴ 嚴(yán)格按照人外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30～60min。
?、?加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí)，要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間，防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?，難以清洗*。
(3)封板溫育時(shí)，各孔一定要封嚴(yán)，防止陽(yáng)性標(biāo)本的液體蒸發(fā)，產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(4)用洗板機(jī)洗板時(shí)，保證洗液注滿(mǎn)各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干：還要防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過(guò)程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(5)合理安排檢測(cè)量，以免反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。
(6)加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
(7)顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。
(8)加樣時(shí)保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
(9)應(yīng)保證C清潔，整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至限度。從而提高檢測(cè)的特異性。并得到更準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
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