微量混合DNA是法醫(yī)DNA檢驗(yàn)的難題,因?yàn)閷?duì)多人混合的DNA圖譜進(jìn)行拆分比較困難。分離單細(xì)胞后檢測(cè)全基因組DNA可以避免處理混合DNA。
單細(xì)胞通過(guò)二代測(cè)序檢測(cè)DNA的方法流程:
細(xì)胞分離、裂解、單細(xì)胞全基因組擴(kuò)增和二代測(cè)序。
目前,已有多種以單個(gè)基因組為模板的全基因擴(kuò)增技術(shù),包括
寡核苷酸引物 PCR 技術(shù)(degenerate oligonucleotideprimed PCR, DOP-PCR)
多重置換擴(kuò)增技術(shù)(multipledisplacement amplification, MDA)
多次退火環(huán)狀循環(huán)的擴(kuò)增技術(shù)(multiple annealing and looping-based amplification cycles, MALBAC)
PicoPLEX技術(shù)相比這些WGA技術(shù),具有zui高的可重復(fù)性。
WGA:whole genome amplification,全基因組擴(kuò)增技術(shù)
參考文獻(xiàn):
單細(xì)胞分離檢驗(yàn)技術(shù)在法醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用研究
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刑事技術(shù) 2015 年 第 40 卷 第 5 期
PicoPLEX® WGA Kit單細(xì)胞全基因組擴(kuò)增試劑盒介紹
英文名稱:Rubicon PicoPLEX WGA Kit
中文名稱:Rubicon PicoPLEX單細(xì)胞全基因組擴(kuò)增試劑盒
品牌:Rubicon Genomics
貨號(hào):R30050或RB3050(TAKARA版)
從單細(xì)胞中擴(kuò)增DNA構(gòu)建高重復(fù)性的文庫(kù)現(xiàn)在成為可能!PicoPLEX WGA kit采用技術(shù),設(shè)計(jì)、優(yōu)化用于從單細(xì)胞中擴(kuò)增單拷貝基因組DNA。便捷的單管操作流程減少了手動(dòng)操作的失誤,縮短了獲得結(jié)果的時(shí)間并降低背景。PicoPLEX WGA Kit同樣也可用于6 pg至50 pg的純化gDNA,并兼容微陣列比較基因組雜交(array CGH)分析及PCR。
華雅旗下紅榮微再主營(yíng)醫(yī)療核酸保存文庫(kù)擴(kuò)增等產(chǎn)品,授權(quán)代理(上海)Rubicon Genomics單細(xì)胞文庫(kù)擴(kuò)增試劑。