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技術(shù)支持

BioGems無血清培養(yǎng)基轉(zhuǎn)鐵蛋白問答
更新時間:2018-04-18   點(diǎn)擊次數(shù):1617次

1. 什么是轉(zhuǎn)鐵蛋白?

轉(zhuǎn)鐵蛋白的英文名為Transferrin,簡稱TF,是血漿中主要的含鐵蛋白質(zhì),負(fù)責(zé)運(yùn)載由

消化管吸收的鐵和由紅細(xì)胞降解釋放的鐵。

人類轉(zhuǎn)鐵蛋白zui早在血清中發(fā)現(xiàn)由兩個結(jié)構(gòu)相似的分別位于 N-端和 C-端的球形結(jié)構(gòu)域組成,為單一糖蛋白肽鏈,共含678個氨基酸殘基,分子量約為80kD,等電點(diǎn)為 5.9。每個轉(zhuǎn)鐵蛋白分子能可逆性地結(jié)合兩個三價鐵離子(Fe3+)。

 

2. 無血清培養(yǎng)基為什么要添加轉(zhuǎn)鐵蛋白?

轉(zhuǎn)鐵蛋白在無血清培養(yǎng)基中具有非常重要的作用,具體包括:

1) 避免細(xì)胞外環(huán)境中自由基的產(chǎn)生,防止細(xì)胞受到傷害

2) 維持細(xì)胞的生長和增殖

3) 維持細(xì)胞內(nèi)的鐵平衡

 

3. 無血清培養(yǎng)基的轉(zhuǎn)鐵蛋白應(yīng)該選擇什么級別的?

天然提取的轉(zhuǎn)鐵蛋白具有安全性差和批間差大等缺陷。尤其是將提取的轉(zhuǎn)鐵蛋白添加于用于細(xì)胞治療的無血清培養(yǎng)基中時,可能會將人或動物的病原體(如瘋牛病病毒,克雅氏病毒和其它未知病原體)藉回輸人體的細(xì)胞而帶入人體,從而發(fā)生非預(yù)期的疾病。而來源于植物重組的轉(zhuǎn)鐵蛋白則可*避免人或動物病原體污染的可能性,因此更適合用于配制細(xì)胞治療用

的無血清培養(yǎng)基。

 

4. 什么是重組的人轉(zhuǎn)鐵蛋白?

重組的人轉(zhuǎn)鐵蛋白是利用基因工程技術(shù)讓人轉(zhuǎn)鐵蛋白基因在宿主中表達(dá)。

 

5. 為什么是水稻來源的人轉(zhuǎn)鐵蛋白?

目前已經(jīng)利用大腸桿菌,酵母,動物細(xì)胞表達(dá)了人的重組轉(zhuǎn)鐵蛋白,但總體來說蛋白產(chǎn)量低,生物活性差,不具備商業(yè)應(yīng)用價值。而動植物表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)的轉(zhuǎn)鐵蛋白具有很好的生物活性,并且成本低,易規(guī)?;?。

 

6. BioGems的重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白的活性?

BioGems重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白是活性相當(dāng)于人血清鐵飽和的轉(zhuǎn)鐵蛋白(holo transferrin)。

活性驗證方法:在無血清添加培養(yǎng)基中通過與天然人轉(zhuǎn)鐵蛋白在雜交瘤細(xì)胞的抗體生產(chǎn)中比較來證實生物學(xué)活性。

 

參考文獻(xiàn):

1重組轉(zhuǎn)鐵蛋白的研究進(jìn)展 DOI:10.3969/cmba.j.issn.1673-713X.2010.06.011  

 

無血清培養(yǎng)基添加物

BioGems(PeproTech)重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白

 

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