1、HES自然沉降法:即肝素抗凝血與6%HES按5:1混合,自然沉降60min,取上層液400×g離心10min,以RPMI1640洗兩遍。或者自然沉降30min,取上層液體按2:1加到淋巴細胞分離液(相對密度:1.077)的液面上層,以460g離心25分鐘,采集界面層細胞,以磷酸鹽緩沖液(PBS)或RPMI1640洗滌2次。
2、HES離心沉淀法:6%的羥乙基淀粉溶液與含抗凝劑的臍血按1:5或者1:6(羥乙基淀粉終濃度為:1.2%或者1.0%)比例*混勻后,經(jīng)離心,(60×g,10℃,10min),取上層液400×g離心10min,以RPMI1640洗兩次備用。
【Hospira羥乙基淀粉HES的注意事項】
避免過量使用引起液體負荷過重,特別是心功能不全和嚴重腎功能不全的病人,液體負荷過重的危險性增加,應(yīng)調(diào)整劑量。為防止重度脫水,使用本品前應(yīng)先給予晶體溶液。嚴重肝臟疾病或嚴重凝血功能紊亂的病人應(yīng)慎用,如嚴重Willebrand病的患者。應(yīng)補充充足的液體,定期監(jiān)測腎功能和液體平衡。應(yīng)密切監(jiān)測血清電解質(zhì)水平。有關(guān)過敏性樣反應(yīng)的發(fā)生,見【不良反應(yīng)】項。應(yīng)避免與其它藥物混合。
如果在特別情況下需要與其它藥物混合,要注意相容性(無絮狀或沉淀)、無菌及均勻混合。瓶或袋開啟后,應(yīng)立即使用。超過有效期后不能使用,未用完的藥品應(yīng)丟棄。只有在溶液澄清及容器未損壞時使用。放在兒童不能接觸到的地方。使用本品期間,如出現(xiàn)任何不良事件和/或不良反應(yīng),應(yīng)咨詢醫(yī)生。同時使用其他藥品,請告知醫(yī)生。
【Hospira羥乙基淀粉HES的不良反應(yīng)】
極個別患者在使用含羥乙基淀粉的藥品時,可能發(fā)生過敏性樣反應(yīng)(過敏反應(yīng),類似中度流感的癥狀,心動過速,支氣管痙攣,非心源性肺水腫)。在輸液過程中,如患者發(fā)生不可耐受的反應(yīng),應(yīng)立即終止給藥,并給予適當(dāng)?shù)闹委熖幚?。給予羥乙基淀粉時,患者血淀粉酶濃度將升高,可能干擾胰腺炎的診斷。
長期大劑量使用羥乙基淀粉時,患者會出現(xiàn)皮膚瘙癢。大劑量使用時,由于稀釋效應(yīng),可能引起血液成分如凝血因子、血漿蛋白的稀釋,以及紅細胞壓積的下降。使用羥乙基淀粉時,可能發(fā)生與劑量相關(guān)的血液凝結(jié)異常。